שיטת זיהוי של חומצה glycyrrhetinic

הקדמה קצרה של חומצה Glycyrrhetinic

חומצה גליקוריזית היא המרכיב הפעיל העיקרי בשוש. חומצה גליקוריזית וסדרת מוצריה יכולים לעכב את הצמיחה של סרקומה ותאי סרטן, ושיעור העיכוב של איידס הוא עד 90%. יש לו השפעה חזקה על הגברת התפקוד החיסוני של האדם, והוא גם תוסף מזון טוב ותבלינים. בשנים האחרונות הוא מיושם באופן נרחב גם בתעשיות כמו תרופות, כימיקלים, מזון ומוצרים כימיים יומיומיים.

שוש, כרפואה סינית מסורתית נפוצה, התקבלה והשתמשה על ידי אנשים. המרכיבים העיקריים שלו הם glycyrrhizin, glycyrrhizin, glycyrrhetinic acid, glycyrrhetinic acid, glycyrrhizin flavonoids, berberine, quercetin, וכו'. יש לו ניקוי רעלים, אנטי דלקתי, מדכא שיעול, אנטי גידולים, אנטי כיבים, אנטיבקטריאליים ואחרים. במקביל, glycyrrhizin יכול לעכב את התפשטות נגיף האיידס; לחומצה גליקרית יש השפעות מעכבות הן על מיאלומה והן על סרטן הכבד המיימת. לחומצה Glycyrrhetinic יש השפעה אנטי-דיורטית משמעותית; ל-Glycyrrhizin ו-isoliquiritigenin יש השפעות נוגדות כיבים ועוויתות; לפלבנואידים של שוש עדיין יש השפעות נוגדות חמצון ואנטי בקטריאליות.

מספר CAS: 1405-86-3
מספר EINECS: 215-785-7
נוסחה מולקולרית: C42H62O16
משקל מולקולרי: 822.92
נקודת רתיחה: 1050.9 מעלות צלזיוס ב-760 מ"מ כספית
נקודת הבזק: 589.4 מעלות צלזיוס
לחץ קיטור: 0ממ כספית ב-25 מעלות צלזיוס
שימוש: כתרופה, יש לה השפעות אנטי דלקתיות ואנטי אלרגיות; כממתיק, הוא נמצא בשימוש נרחב בסוגי מזון שונים.
מראה: מוצר זה הוא אבקה גבישית לבנה, חסרת ריח, ובעלת טעם מתוק מיוחד.

יישום:
(1) זהו ממתיק בריאותי בעל מתיקות גבוהה, דל קלוריות, עם מתיקות של בערך פי 250 מזו של סוכרוז
לְמַעלָה; ניתן להוסיף כממתיק בתעשיית המזון, המשקאות והממתקים, ויכול לשמש גם כפיגמנט טבעי במזונות ומשקאות צהובים או חומים.
(2) תעשיית התרופות: משמשת להקלה על שיעול ומכיח, כיב קיבה, דלקת קיבה חריפה וכרונית, אקזמה, גירוד בעור, הפטיטיס, היפרליפידמיה, וירוס הפפילומה, דלקת הלחמית, ולטיפול בסרטן ומניעת איידס.
(3) תעשיית הקוסמטיקה והסיגריות; זה יכול למנוע דרמטיטיס, עור יבש, חשיפה לשמש, פריחה, הרטבת גרון וכו'.
(4) תמצית ליקוריץ יכולה להפעיל קורטיקוסטרואידים (לעכב אנזימים מטבוליים), לשפר בעקיפין את תפקידם של קורטיקוסטרואידים, וניתן להשתמש בה בכל מוצרי הקוסמטיקה כגון שמנת, שמנת, מים, טל, קרם, חלב ודבש. זה יכול לנטרל או להסיר או להפחית את החומר הרעיל של מוצרי קוסמטיקה, וגם למנוע תגובות אלרגיות של כמה מוצרי קוסמטיקה, מה שמתאים יותר לקוסמטיקה מתקדמת לשיער או לעור.
(5) לפלבנואידים של שוש יש השפעה מעכבת קלה על טירוזינאז, ותמצית שוש הוכחה כחומר הלבנת הצמח היעיל ביותר.

שיטות הזיהוי של חומצה glycyrrhetinic כוללות בעיקר את הדברים הבאים:

כרומטוגרפיה בשכבה דקה: לוקחים אבקת תמצית ליקריץ, מחלצים עם אתר, שוטפים במים ומאדים וממיסים את השאריות במתנול. מניחים את תמיסת דגימת הבדיקה על צלחת סיליקה ג'ל G בשכבה דקה, תוך שימוש במי חומצה קרחונית של חומצה אצטית אתיל אצטט (15:1:1:2) כחומר הפיתוח. לאחר הפיתוח, יש לרסס בתמיסת אתנול חומצה גופרתית 10%, לחמם ב-105 מעלות עד שהכתמים ברורים, ולבדוק באור אולטרה סגול (365 ננומטר). הכרומטוגרפיה של דגימת הבדיקה צריכה להציג כתמים פלואורסצנטיים באותו צבע במיקום המתאים לכרומטוגרפיית החומר הרפואי הבקרה.
שיטת הידרוליזה של חומצה הידרוכלורית: לאחר הידרוליזה של תמצית ליקוריץ עם חומצה הידרוכלורית, הוא נצבט על שכבה דקה של סיליקה ג'ל G. הוא פותח עם נפט-אתר בנזן חומצה אצטית אתיל (10:20:7:0.5), מרוסס עם כלורוסולפוני חומצה אצטית (1:3) מגיב, ואפוי ב-110 מעלות למשך 5 דקות. חומצה Glycyrrhetinic מציגה כתמים צהובים.
2,6-שיטה קולורימטרית dibutyl-p-cresol: לאחר מיצוי והפרדת שרף, הדגימה קולורימטרית עם ריאגנט 2,6-dibutyl-p-cresol ב-575nm.
שיטה קולורימטרית ונילין: חומצה גליצרית עוברת הידרוליזה לחומצה גליצירית, ולאחר מכן מגיבה עם חומצה גופרתית, חומצה אצטית וונילין ב-545 ננומטר לניתוח קולורימטרי.
שיטה קולורימטרית קובלט כלוריד: אבקת הדגימה מופקת עם אתנול נטול מים, מדוללת במים, והתמיסה המופקת מוכתמת על שכבה דקה של סיליקה ג'ל G ומפותחת עם מי חומצה אצטית בוטנול (6:1:3). לאחר ייבוש ב-105 מעלות למשך 30 דקות, נעשה שימוש באדי יוד כדי לצבוע ולסמן את מיקומם של כתמי חומצה גליצירטית.
מאפיינים כימיים ושימושים של חומצה glycyrrhetinic:
תרכובת גליציריזין היא תרכובת אורגנית עם הנוסחה המולקולרית C42H62O16 ומשקל מולקולרי של 822.93. קשה להמיס במים קרים וקל להמסה במים חמים. יש לו השפעות אנטי דלקתיות ואנטי אלרגיות והוא נמצא בשימוש נרחב במזונות שונים וברפואה סינית מסורתית.

שיטת בדיקה של חומצה glycyrrhetinic

השיטה הנפוצה לזיהוי תכולת החומצה הגליצרטית בדגימות היא כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC).
זה כולל תהליכים כגון עיבוד דגימה, הגדרת מצב כרומטוגרפי, הכנת עקומה סטנדרטית, קביעת דגימה וחישוב.

1. עיבוד לדוגמא
שקלו במדויק {{0}}.5 גרם מהדגימה, הניחו אותה בבקבוקון נפח של 50 מ"ל, הוסיפו 20 מ"ל של פאזה ניידת, חלצו באולטרסאונד למשך 20 דקות, צנטריפוגה במהירות 3000 r/min למשך 5 דקות, סנן דרך קרום 0.45um, והניח בצד לשימוש מאוחר יותר.
2. הגדרת מצב כרומטוגרפי
שימוש בעמודת כרומטוגרפיה C18 מסורתית וידידותית למשתמש (25{{10}} * 4.6mm, 5um), טמפרטורת עמודה של 25 מעלות, גלאי UV, אורך גל מוגדר ל-250nm, נפח הזרקה של 10ul, קצב זרימה של 1.0 מ"ל/דקה, ואצטוניטריל 0.1% תמיסה של חומצה זרחתית (35:65) בתור שלב נייד.
3. ייצור עקומות סטנדרטיות
תמיסה סטנדרטית, קח כמות מתאימה של חומר ייחוס לחומצה גליציריזית, שקלו במדויק ודלל לנפח עם 80% מתנול. יש לדלל את הדגימה בשיפוע סטנדרטי ולהזריק אותה ל-HPLC לזיהוי כדי לקבל נתוני שיא כרומטוגרפיים. בהתבסס על שטח השיא והריכוז המתאים, צור עקומה סטנדרטית, חשב את משוואת הרגרסיה וקצב ההתאוששות.
4. מדידה וחישוב לדוגמה
מדוד את תמיסת החומצה הגליצרטית המעובדת על ידי HPLC, קרא את נתוני השיא הכרומטוגרפיים בתוכנת מחשב, וחשב את תכולת החומצה הגליצרטית בדגימה על ידי שילובה עם העקומה הסטנדרטית. במהלך הניתוח, הנסיינים צריכים ללבוש כפפות פלסטיק ומסכות כדי למנוע זיהום הדגימות. יחד עם זאת, רישומי הפעולה צריכים להיות בזמן ואובייקטיביים כדי להבטיח נתונים מדויקים.